铁棒锤中双酯型生物碱的测定
【摘要】目的建立铁棒锤中双酯型生物碱快速、简便、专属性强测定的方法。方法采用分光光度法，使用为对照品。结果回收率为98.3%，rsd为0.72%。结论所建立的方法精密度高，重现性良好，结果准确可靠，可用于铁棒锤中的双酯型生物碱的测定。
【关键词】铁棒锤；双酯型生物碱
铁棒锤别名八百棒、铁牛七、雪上一枝蒿，毛茛科乌头属植物铁棒锤aconitum szechenyianum gay.和伏毛铁棒锤a.flavum hand.-mazz，以块根入药。具有祛风止痛，散瘀止血，消肿拔毒等作用。
铁棒锤收载于2010年版药典一部附录ⅲ中，为藏药成方制剂中的常用药材，同时是具有藏药特的药材代表，其同科属植物有附子、川乌等。该科属主要毒性存在于双酯型生物碱中，为有效地控制药材的质量，同时保证患者的用药安全，本文通过使用紫外分光光度法以计控制了铁棒锤中双酯型生物碱的含量，从而控制了铁棒锤的质量。
1仪器与试药
1.1仪器岛津uv-2450型紫外分光光度计；auw220d型岛津电子分析天平；kq-300b型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；rotavapor r-20型旋转蒸发仪（瑞士buchi公司）。
1.2试药对照品（中国药品生物制品检定所），批号：110720-200410；铁棒锤药材（青海金诃藏药药业股份有限公司），批号分别为：120701、120702、120703。水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1对照品溶液的制备精密称取对照品适量，加无水乙醇溶解并稀释，制成每1ml无水乙醇溶液含1.0mg的溶液。
2.2标准溶液的制备精密吸取对照品溶液0、1、2、3、4、5ml，分别置于25ml量瓶中，加无水乙醇使成5ml，加3.5mg/ml盐酸羟胺的60%乙醇液1ml、4mol/l的氢氧化钠溶液1ml，振摇，室温放置15min，加5mol/l的盐酸1ml、水15ml、9%三氯化铁溶液1ml，振摇，使生成的沉淀溶解，加水至刻度，放置30min即得
2.3样品溶液的制备取样品3g，精密称定，于250ml具塞的锥形瓶中，加50ml、10%
氨水2.5ml，超声提取1h。过滤，残渣用洗涤3次，合并洗液与滤液，低温挥干溶剂，残渣用乙醚20ml溶解，用0.5mol/l的盐酸萃取3次，每次10ml。酸液用氨水调节ph至10以上，再用萃取4次，每次15ml，回收溶剂至干，残渣用无水乙醇溶解并定容至10ml，摇匀，精密量取3ml于25ml的量瓶中，加无水乙醇2ml，按“2.2”所述操作，即得。
2.4buchi测定波长的选择取“2.2”项下空白溶液、标准品溶液及“2.3”项下样品溶液于200-600nm处进行扫描，结果表明对照品溶液与供试品溶液在530nm处均有最大吸收，故确定530nm为检测波长。
2.6重现性试验取铁棒锤药材样品6份，按总生物碱含量测定项下方法测定，计算总生物碱含量及其相对标准偏差。结果表明：平均含量为0.135%，rsd为0.69%，该方法重复性良好。
2.7回收率试验精密称取已知总生物碱含量的铁棒锤药材样品6份，分别精密加入对照品，按总生物碱含量测定项下方法测定，计算回收率及其相对标准偏差。结果表明：该测定方法回收率为98.3%，rsd为0.72%，回收率良好。
3讨论
铁棒锤中主要活性为生物碱类成分，、新、次等双酯型生物碱类成分为铁棒锤中重要的活性成分及毒性成分，现代药理已经证明具有镇痛、消炎、局麻等作用，在药材的质量评价及毒性控制方面具有中药的意义。
、新、次现代测定方法多以hplc法进行分离测定，本文也曾采用药典中川乌的双酯型生物碱测定方法测定铁棒锤，但效果不理想。考虑双酯型生物碱绝非只有上述3种，本文通过植化的方法将双酯型生物碱进行富集，通过紫外分光光度法进行测定，通过方法学验证试验证明，该法简便、可靠、重复性高，可用于铁棒锤的质量控制。
参考文献
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