还原糖的测定实验报告[生物化学实验报告]实验一糖类的性质实验
〔一〕糖类的颜反响
一、实验目的1、了解糖类某些颜反响的原理。
2、学习应用糖的颜反响鉴别糖类的方法。
二、颜反响
〔一〕α-萘酚反响
1、原理糖在浓无机酸〔硫酸、盐酸〕作用下，脱水生成糠醛及糠醛
衍生物，后
者能与α-萘酚生成紫红物质。因为糠醛及糠醛衍生物对此反响均
呈阳性，
故此反响不是糖类的特异反响。
2、器材
试管及试管架，滴管
3、试剂
莫氏试剂：5％α-萘酚的酒精溶液1500mL.称取α-萘酚5g，溶于95％酒精
中，总体积达100mL，贮于棕瓶内。用前配制。
1％葡萄糖溶液100mL1％果糖溶液100mL1％蔗糖溶液100mL
1％淀粉溶液100mL
0.1％糠醛溶液100mL
浓硫酸500mL
4、实验操作
取5支试管，分别参加1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液、1％淀
粉溶液、0.1％糠醛溶液各1mL。再向5支试管中各参加2滴莫氏试剂，充
分混合。倾斜试管，小心地沿试管壁参加浓硫酸1mL，慢慢立起试管，切勿
摇动。观察记录各管颜。
〔二〕间苯二酚反响1、原理
在酸作用下，酮醣脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成
红物
质。此反响是酮醣的特异反响。
醛糖在同样条件下呈反响缓慢，只有在糖浓度
较高或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反响。
实验条件下蔗醣有可能水解而呈
阳性反响。
2、器材
试管及试管架，滴管
化学实验报告3、试剂
塞氏试剂：0.05％间苯二酚－盐酸溶液1000mL，称取间苯二酚0.05g 溶于
30mL浓盐酸中，再用蒸馏水稀至1000mL。1％葡萄糖溶液100mL
1％果糖溶液100mL
1％蔗糖溶液100mL
4、实验操作
取3试管，分别参加1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液各0.5mL。再向3支试管中各参加塞氏试剂5mL，充分混合。将试管同时放入沸水浴中，
观察记录各管颜。
(二)糖类的复原作用
一、实验目的1、理解并掌握糖类的复原性质；
2、学习常用的鉴定糖类复原性的方法。
3、了解斐林氏、本尼迪克特试法检验糖的原理
二、实验原理
复原糖是指含有自由醛基〔如葡萄糖〕或酮基〔如果糖〕的单糖和某些二糖〔如乳糖和麦芽糖〕。在碱性溶液中，复原糖能将Cu2+、Hg2+、Fe3+、Ag+等金
属离子复原，而糖本身被氧化成糖酸及其他产物。
糖类的这种性质常被用于糖的定性和定量测定。
三、器材
试管及试管架，水浴锅电炉
四、试剂
1斐林试剂
甲液氢氧化钠的质量分数为0.1g/mL的溶液。
乙液硫酸铜的质量分数为
0.05g/mL的溶液。
2本尼迪克特试剂
31％葡萄糖溶液100mL
41％果糖溶液100mL
5、1％蔗糖溶液100mL
五实验操作
六思考题
1、斐林氏、本尼迪克特试法检验糖的原理是什么？
2、试比拟斐林氏、本尼迪克特试法的方法。
实验二总糖的测定---蒽酮比法
一、实验目的掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法。
二、实验原理
强酸可使糖类脱水生成糠醛，生成的糠醛或羟甲基糖醛与蒽酮脱水缩合，形
成糠醛的衍生物，呈蓝绿，该物质在620nm处有最大吸收。在10-100ug范围
内其颜的深浅与可溶性糖含量成正比。这一方法有很高的灵敏度，糖含量在
30ug左右就能进行测定，所以可做为微量测糖之用。一般样品少的情况下，采
用这一方法比拟适宜。
三、仪器、试剂和材料
1.仪器
(1)分光光度计
(2)电子顶载天平
(3)三角瓶：50m1某1(4)大试管：9支(5)试管架，试管夹
(6)漏斗，漏斗架
(7)容量瓶：50m1某2
(8)刻度吸管：1m1某3，2m1某1，5ml某1
(9)水浴锅
2.试剂